在高效液相色譜實(shí)驗(yàn)中,沒有氣泡進(jìn)入系統(tǒng),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致雜峰的產(chǎn)生。介紹了
二手高效液相色譜儀產(chǎn)生氣泡的原因及消除方法。
1、溶劑混合:液相色譜儀溶劑混合時(shí),由于兩種液體熱力學(xué)體積的變化會產(chǎn)生氣泡,混合時(shí),容易產(chǎn)生放熱或吸熱氣泡,如:甲醇和水的混合屬于放熱,乙腈和水的混合屬于吸熱。通常情況下,混合后體積明顯增大或減小,產(chǎn)生許多小氣泡,懸掛在瓶子的墻上,或搖動以看到液體中的許多小氣泡。故障排除:溶劑過濾、超聲波脫氣,特別是乙腈與水混合時(shí),超聲波脫氣時(shí)間較長。也可采用安裝在線除氣器、充氮除氣等其他方法進(jìn)行除氣。
2、溶劑過濾頭污染:溶劑過濾頭污染會導(dǎo)致泵在抽吸過程中吸入不均勻,強(qiáng)制抽吸,產(chǎn)生微小的真空氣泡。此時(shí),可以觀察到許多很小的氣泡分布在入口管壁上,有的停留在管壁上,有的感覺速度小于設(shè)定值,壓力不穩(wěn)定。高效液相色譜儀故障排除:先觀察現(xiàn)象確認(rèn),再排除。用5%-10%稀硝酸浸泡一夜或超聲處理數(shù)小時(shí),然后用純凈水浸泡一夜或超聲波處理,注意水的變化幾次,將酸渣洗凈,然后采用有機(jī)相甲醇浸泡處理或超聲波處理。如果上述處理失敗,應(yīng)更換新的溶劑過濾器。
3、液相色譜儀的流動相不排氣:移動相就位后,沒有排氣,開始運(yùn)行泵,容易產(chǎn)生氣泡。排除問題:放置移動相后,打開旁路閥,用注射器慢慢吸干液體。在觀察到液體進(jìn)口管沒有氣泡后,吸10毫升以驅(qū)動流道中的空氣,擰下旁路閥,然后運(yùn)行泵,或打開旁通閥,以大流量排出液體。在觀察到進(jìn)液管中沒有氣泡后,將流道中的空氣排出2分鐘,擰緊旁路閥,然后運(yùn)行泵。
4、泵污染:基本上是止回閥或泵頭的內(nèi)部污染。泵頭是一個(gè)壓力變化很大,容易產(chǎn)生氣泡的地方。泵頭通過負(fù)壓吸收液體。負(fù)壓必然導(dǎo)致流動相小氣泡長大。當(dāng)泵室改變正壓時(shí),長大的氣泡可能不會全部變小,流入后續(xù)的液路,氣泡會在泵室中積聚,從而影響液體吸收的精度。高效液相色譜儀泵污染故障排除:仔細(xì)清除泵頭,用甲醇超聲清洗,向閥,并將內(nèi)密封圈和泵頭整體清洗干凈,用甲醇擦拭柱塞桿。必要時(shí)更換高效液相色譜儀的單向閥、密封圈和柱塞桿。
5、注射液產(chǎn)生:進(jìn)樣時(shí)將氣泡帶入,吸樣時(shí)應(yīng)排除注射針中的氣泡故障:進(jìn)樣前,注意注射針內(nèi)的空氣,注射針垂直向上,用指墊壓針,向上推,氣泡很容易上升,注射針可以排出。
6、色譜柱氣泡的排除:用純甲醇在低流速(0.2-0.3ml/min)下長時(shí)間清洗反相色譜柱,然后逐漸增加流速至1ml/min,直至色譜柱壓力穩(wěn)定,或者更換色譜柱。
7、高效液相色譜檢測儀:流動池是氣泡容易積聚的地方,對基線有很大影響。當(dāng)流動相進(jìn)入柱內(nèi)時(shí),壓力越來越小,微氣泡逐漸長大。當(dāng)流動池的橫截面積較大時(shí),池內(nèi)氣泡容易生長,在無外壓的情況下很難收縮到管道內(nèi)。池體在內(nèi)徑以下流出道路,導(dǎo)致池體的存在,導(dǎo)致基線混亂。故
8、液相色譜儀的障排除:在液相色譜儀的廢液出口加裝背壓調(diào)節(jié)器,為循環(huán)池提供背壓;其次,用手指堵住廢液管的液體端,觀察泵柱壓力上升,松開,同時(shí)查看檢測器顯示屏上吸光度值的變化。如果池中有氣泡,則吸光度值將發(fā)生顯著變化。當(dāng)手松開時(shí),吸光度值將再次升高。證明池中有氣泡,但沒有排出。當(dāng)手指被卡松時(shí),吸光度值基本不變,說明排氣氣泡成功,基線穩(wěn)定。